美女操逼网站,欧美日韩国产精品一区色欲,大鸡巴狂操美女裸体,欧美图片国产综合

      <pre id="rnsxh"><label id="rnsxh"><th id="rnsxh"></th></label></pre>
      

        <p id="rnsxh"><pre id="rnsxh"></pre></p>
        

        
    
        
      
        
        
        
            
            
        
                
        銷(xiāo)售熱線(xiàn)
        
                19126518388
            
        
        
        
      
        
      
        
      
             
         
    
         
         

  
  
  
        
    
        
	  
        
        
        
        
 
        
     
   
 
         
         
        
	   
        
    
        
  
        
      

        
  
        
    
          
      
        • 
        
          
        
          
            
          技術(shù)文章ARTICLE
          
            
          您當(dāng)前的位置：首頁(yè) > 技術(shù)文章 > 免疫細(xì)胞轉(zhuǎn)染實(shí)操時(shí)的幾大步驟說(shuō)明
          
          
          
          
        
          

          
          
          
            
          
                
          免疫細(xì)胞轉(zhuǎn)染實(shí)操時(shí)的幾大步驟說(shuō)明
          
                
          
                  發(fā)布時(shí)間： 2022-10-09　　點(diǎn)擊次數(shù)： 1180次  
                
          
                
          
                  　　對(duì)于免疫細(xì)胞轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)，我們拿脂質(zhì)體為例，其作為體內(nèi)和體外輸送載體的工具，已經(jīng)研究的十分廣泛，中性脂質(zhì)體是利用脂質(zhì)膜包裹DNA，借助脂質(zhì)膜將DNA導(dǎo)入細(xì)胞膜內(nèi)。帶正電的陽(yáng)離子脂質(zhì)體，DNA并沒(méi)有預(yù)先包埋在脂質(zhì)體中，而是帶負(fù)電的DNA自動(dòng)結(jié)合到帶正電的脂質(zhì)體上，形成DNA-陽(yáng)離子脂質(zhì)體復(fù)合物，從而吸附到帶負(fù)電的細(xì)胞膜表面，經(jīng)過(guò)內(nèi)吞被導(dǎo)入細(xì)胞。
          　　具體實(shí)操時(shí)的步驟如下：
          　　1.細(xì)胞培養(yǎng)：取6cm細(xì)胞皿，向每孔中加入2mL含1~2×105個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)液，37℃二氧化碳培養(yǎng)密度至40%~60%，密度過(guò)大，轉(zhuǎn)染后不利篩選細(xì)胞。
          　　2.轉(zhuǎn)染液在EP管中制備(為轉(zhuǎn)染每一個(gè)孔細(xì)胞所用的量)：
          　　A液：用不含血清培養(yǎng)基稀釋1ug質(zhì)粒DNA；
          　　B液：用不含血清培養(yǎng)基稀釋2ul脂質(zhì)體。
          　　分別將A液與B液輕彈混勻，靜置5分鐘。
          　　3.吸取B液加入至A液中，輕彈混勻。室溫中置10-15分鐘。
          　　4.轉(zhuǎn)染準(zhǔn)備：用1mL不含血清培養(yǎng)液漂洗兩次，再加入4mL不含血清培養(yǎng)液。
          　　5.轉(zhuǎn)染：把A/B復(fù)合物緩緩加入培養(yǎng)液中，搖勻，37℃恒溫箱置6~24小時(shí)，吸除無(wú)血清轉(zhuǎn)染液，換入正常培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。
          　　6.瞬時(shí)轉(zhuǎn)染后，可在48-72h細(xì)胞長(zhǎng)滿(mǎn)之后，提取細(xì)胞蛋白或者RNA，驗(yàn)證敲減/過(guò)表達(dá)效率。
          
                
          
                
            
          
        
          
     
          
     
          
   
          
 
          
 
          • 

        

  
        
    
        
	  
        
	    
        
        
        
          產(chǎn)品中心
          Products